Qu'est-ce que l'immunodosage chimiluminescent
Le dosage immunologique par chimiluminescence (CLIA) est une technique de dosage immunologique où le marqueur, c'est-à-dire le véritable « indicateur » de la réaction analytique, est une molécule luminescente. En général, la luminescence est l'émission d'un rayonnement visible ou proche du visible qui est généré lorsqu'un électron passe d'un état excité à un état fondamental. L'énergie potentielle résultante dans l'atome est libérée sous forme de lumière. (Cinquanta, Fontana et Bizzaro, 2017) Les immunoessais chimiluminescents offrent l'une des meilleures solutions pour la quantification de faibles concentrations d'analytes spécifiques à partir d'un mélange complexe pour l'industrie du diagnostic in vitro. Ils peuvent également être utilisés comme outils de diagnostic en médecine, ainsi que dans plusieurs autres industries différentes pour diverses applications. (Laboratoires Lorne, 2021)

Comment fonctionne la chimiluminescence
Le dosage immunologique par chimiluminescence (CLIA) est un dosage qui combine les techniques de chimiluminescence avec des réactions immunochimiques. Le format du dosage est similaire aux dosages immunologiques liés à une enzyme, généralement basés sur des dosages hétérogènes dans lesquels des anticorps ou des antigènes sont immobilisés sur une phase solide mais l'un des composants est conjugué à un marqueur chimioluminescent. (Lorne Laboratories, 2021) (BrightTALK, 2021) CLIA utilise des sondes chimiques qui pourraient générer une émission de lumière par le biais de réactions chimiques pour marquer l'anticorps. (Diagnostic créatif, 2021)

Les avantages du dosage immunologique par chimiluminescence
Ces dernières années, CLIA a suscité une attention croissante dans différents domaines, notamment les sciences de la vie, le diagnostic clinique, la surveillance environnementale, la sécurité alimentaire et l'analyse pharmaceutique, car l'utilisation de la chimiluminescence présente des avantages tels que :

• ultra-sensible
• bonne spécificité
• large gamme d'applications
• équipement simple
• large gamme linéaire
• plus facile à utiliser et à concevoir
• peut détecter de petites quantités de la molécule biologique
• ne nécessite pas de longues incubations et l'ajout de réactifs d'arrêt (Creative-diagnostics, 2021)

Principaux types de méthodes de dosage immunologique chimiluminescent
Les méthodes chimiluminescentes couramment observées sont directes - utilisant des marqueurs luminophores, indirectes - utilisant des marqueurs enzymatiques, ou électrogénérées – généralement à base de nanomatériaux. (Cinquanta, Fontana et Bizzaro, 2017) (Ju, Lai et Yan, 2017)

CLIA indirect, utilisant des marqueurs enzymatiques
Cette méthode CLIA courante implique une enzyme, généralement la peroxydase de raifort (HRP) ou la phosphatase alcaline (AP), conjuguée à un anticorps secondaire. Ce HRP– ou le complexe d'anticorps secondaire AP– catalyse ensuite la conversion du substrat chimioluminescent, du luminol et du réactif CSPD respectivement. Ces substrats, lorsqu'ils sont oxydés, fournissent un moyen facile de détection et de quantification du signal en raison d'une émission de signal prolongée. (Shimadzu, 2021)

CLIA direct, utilisant des marqueurs luminophores

Cette méthode utilise couramment des esters d'acridinium comme luminophores conjugués directement à l'anticorps monoclonal primaire pour générer un signal. Les esters d'acridinium sont des marqueurs hautement spécifiques qui s'oxydent spontanément en présence de peroxyde d'hydrogène alcalin, produisant un signal à 429 nm en 2 secondes, par rapport au luminol qui génère un signal plus durable. (Shimadzu, 2021)

Chimiluminescence électrogénérée
Le dosage immunologique par électrochimiluminescence (ECLIA) est une méthode quantitative de mesure d'antigène ou d'anticorps basée sur la modification du signal d'électrochimiluminescence (ECL) avant et après l'immunoréaction. L'ECL est le processus par lequel les espèces générées à l'électrode subissent une réaction de transfert d'électrons à haute énergie pour former des états excités qui émettent de la lumière. Analogue au CL, l'ECL ne nécessite pas l'utilisation de sources lumineuses externes. (Wu et Ju, 2012) (Ju, Lai et Yan, 2017)

Pour conclure, le CLIA direct est l'endroit où le matériau excitant lui-même émet de la lumière, tandis que, dans le CLIA indirect, l'énergie de la réaction chimique excite un autre matériau. Et enfin, ECLIA est la production de lumière par une espèce luminophore excitée générée lors d'une réaction électrochimique. (Wu et Ju, 2012)

Dosage par chimiluminescence déclenché par la lumière
Le dosage chimioluminescent initié par la lumière (LICA) est dérivé du dosage immunologique de canalisation d'oxygène luminescent (LOCI) avec les caractéristiques souhaitées. Semblable au principe de LOCI, LICA est une technologie homogène à base de billes dans laquelle la proximité de billes de chimiothérapie et d'annonces sensibles (< 200 nm) génère de la lumière à travers CL. Cette méthode de dosage immunologique homogène est capable de déterminer rapidement et quantitativement une large gamme d'analytes, y compris des concentrations élevées et très faibles de grandes et petites molécules, des médicaments libres (non liés), de l'ADN et des IgM spécifiques. (Li et al., 2019)

Le dosage chimiluminescent déclenché par la lumière est l'un des formats émergents de dosage immunologique. De plus en plus de fabricants se lancent dans le développement de nouveaux produits basés sur cette nouvelle technologie émergente innovante, car son utilisation présente de nombreux avantages, notamment :

• Homogène
• Haute sensibilité
• Haute spécificité
• Haut débit
• Reproductibilité
• Large plage de détection
• Faible volume d'échantillon
• Ne nécessite pas d'étape de lavage (www.iivd.net, n.d.)

Au fil des ans, de nombreuses études de recherche se sont concentrées sur la supériorité du dosage par chimiluminescence déclenché par la lumière par rapport aux dosages immunologiques conventionnels par chimiluminescence. Néanmoins, le LICA a été largement adopté dans les recherches biomédicales et pourrait potentiellement devenir une tendance mondiale dans l'industrie du DIV pour des perspectives futures. (www.iivd.net, s.d.)

Biotime voit l'énorme potentiel du dosage chimiluminescent déclenché par la lumière de ce que nous pouvons réaliser avec cette plate-forme, c'est pourquoi notre tout nouvel analyseur LICA devrait arriver sur le marché au troisième trimestre de cette année. Déjà, nos équipes de recherche et développement rapportent des résultats prometteurs alors qu'elles travaillent en permanence sur des expériences laborieuses.

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• Performance excellente
• Large gamme linéaire
• Bonne reproductibilité
• Anti-interférence puissant pour garantir des résultats de test fiables
• Phase solide
• Aucune chaîne du froid requise
• Conditions normales de stockage
• Sans lavage
• Pas de déchets liquides
• Réduction des coûts
• Pack de test unique disponible
• Package plus rentable et compétitif à venir

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COURRIEL : baotai@xmbtsw.com