Qu'est-ce que la HPLC ?
La chromatographie liquide à haute performance (HPLC) est une technique analytique permettant de séparer, d'identifier et de quantifier les composants d'un mélange. C'est la plus grande technique de chromatographie essentielle à la plupart des laboratoires dans le monde. (Vues de la chimie, 2021)
Comment fonctionne la HPLC ?
Les composants d'un système de chromatographie liquide haute performance [HPLC] de base sont illustrés dans le schéma simple ci-dessous.
Plutôt en laissant tomber un solvant par gravité via une colonne, il est forcé à haute pression à l'aide d'une pompe HPLC, ce qui en fait une solution très rapide et très précis méthode. (Patil, 2021) Le solvant utilisé pour séparer les composants d'un échantillon liquide pour l'analyse HPLC est appelé phase mobile. La phase mobile est acheminée vers une colonne de séparation, également appelée phase stationnaire, puis vers le détecteur à un débit stable contrôlé par la pompe de distribution de solvant. Une certaine quantité d'échantillon est injectée dans la colonne et les composés contenus dans l'échantillon sont séparés. Les composés séparés dans la colonne sont détectés par un détecteur en aval de la colonne et chaque composé est identifié et quantifié. (Vues de la chimie, 2021)
Types de HPLC
Selon la phase stationnaire de la méthode, il existe quatre types de HPLC
HPLC en phase inversée :
HPLC en phase inversée :
La RP-HPLC est une technique chromatographique dans laquelle la phase mobile est polaire, aqueuse et la phase stationnaire est non polaire (hydrophobe). Les particules dans la colonne en phase inverse sont généralement recouvertes de chaînes carbonées, par exemple C8/C18. Parmi tous les types de méthodes HPLC, nous utilisons environ 70 % de ce processus en raison de sa large applicabilité et de sa reproductibilité. (Patil, 2021)
HPLC en phase normale :
La NP-HPLC est la forme classique de chromatographie ; contrairement à la chromatographie en phase inverse, elle utilise la phase mobile non polaire et la phase stationnaire polaire (hydrophile). (Patil, 2021)
HPLC à exclusion de taille :
La chromatographie d'exclusion stérique ou de filtration sur gel nécessite des particules stationnaires poreuses, piégeant les particules de plus petite taille à l'intérieur et permettant aux molécules de plus grande taille de se déplacer plus rapidement. (Patil, 2021)
HPLC échangeuse d'ions :
Il s'agit d'un mécanisme distinct qui permet de séparer les espèces d'hémoglobine (HbA1c et HbA0) en fonction de la différence de point isoélectrique, en utilisant des différences d'interactions ioniques entre l'hémoglobine dans l'échantillon de sang et les groupes d'échange de cations à la surface de la résine de la colonne. (Patil, 2021)
L'étalon-or
La HPLC est une technologie mature avec une multitude d'applications. Les premières recherches ont déjà découvert son utilisation dans le dépistage du diabète. De plus, la méthode de chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC) est considérée comme la " étalon-or méthode » pour la mesure de l'HbA1c. (Khan, Rokshana et Muhammad, 2012)
Comme la déclaration faite par une équipe de recherche : « L'HbA1c peut être mesurée par une méthode immunologique installée dans un analyseur de chimie automatisé pour rendre le test rentable. Mais la méthode HPLC est préférable . " (Khan, Rokshana et Muhammad, 2012)
L'engagement et l'offre de Biotime
Le diabète non traité entraîne des complications micro et macrovasculaires. La néphropathie, la neuropathie, la rétinopathie et les maladies cardiovasculaires (crise cardiaque et accident vasculaire cérébral) sont décrites. (Eeaglebio, 2021)
Nous savons le coût dévastateur du diabète pour une personne et une famille et c'est pourquoi les gens de Biotime travaillent avec diligence pour rendre l'organisation plus réactive et responsable en la matière.
L'étude DPP (Programme de prévention du diabète de l'American Diabetes Association) a démontré que l'apparition du diabète de type 2 peut être prévenue ou considérablement retardée par des changements de mode de vie et par un traitement avec des médicaments antidiabétiques.
De nombreuses études ont mentionné l'importance d'une surveillance continue de la glycémie et de l'hémoglobine A1c. L'hémoglobine est glycosylée par une réaction non enzymatique en fonction de la quantité de glucose dans le sang. Il reflète la glycémie moyenne sur une période prolongée (1 à 3 mois). (Eeaglebio, 2021)
Analyseur HPLC Biotime HLC-100 utilise la chromatographie échangeuse d'ions. La HPLC échangeuse d'ions est largement reconnue comme la étalon-or pour la mesure de l'HbA1c. L'analyseur HLC-100 HbA1c permet de déterminer l'HbA1c de manière simple, rapide et précise. Sur la base du principe HPLC, des résultats très précis pour l'HbA1c sont disponibles en 2 minutes. Le kit de dosage comprend tous les réactifs dans le formulaire prêt à l'emploi pour la préparation et la séparation des échantillons avec les contrôles disponibles à votre demande.
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Les références
Chemistryviews.org. 2021. Qu'est-ce que la HPLC ? :: Éducation :: ChemistryViews. [en ligne] Disponible sur :
Patil, M., 2021. Différents types de chromatographie HPLC. [en ligne] Chrominfo.blogspot.com. Disponible à:
Khan, A., Rokshana, R. et Muhammad, S., 2012. Mesures de l'HbA1c par chromatographie liquide haute performance dans l'analyseur D-10 et méthode immunologique par le système Beckman Coulter AU480 : une étude comparative. [ebook] Disponible sur :
Aiglebio. 2021. [en ligne] Disponible sur :